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了解毛細管電泳儀的工作原理

更新時間:2022-06-20      點擊次數(shù):2855
  毛細管電泳儀是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動力的新型液相分離技術(shù)。實際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進入納升水平,并使單細胞分析,乃至單分子分析成為可能。毛細管電泳儀是根據(jù)在電解質(zhì)溶液中,帶電粒子在高壓電場作用下,以不同的速度定向遷移的現(xiàn)象來達到組分分離的目的。各組分分離后通過檢測器進行檢測,并根據(jù)各組分的遷移時間和響應(yīng)值進行定性、定量分析。
 
  工作原理:
  毛細管兩端分別浸入緩沖液中,而緩沖液中分別插入連有高壓電源的電極,根據(jù)被分離物之間電荷和體積的不同,帶電荷分子朝相反極性的電極方向移動。又利用毛細管內(nèi)壁上的電荷和應(yīng)用的勢能而引起的電解質(zhì)移動,毛細管內(nèi)表面帶有硅羥基基團,當毛細管內(nèi)充滿緩沖溶液時,毛細管壁上的硅羥基發(fā)生解離,生成氫離子溶解在溶液中,這樣就使毛細管壁上形成雙電層,管壁是負電荷層,溶液是正電荷層。在毛細管的兩端加上直流電場后,帶正電的溶液就會整體向負極的一端移動,形成了電滲流。無論是帶正電、帶負電或不帶電的粒子,都在電滲流的作用下,向陰極遷移,帶正電的,受到同方向的電場力作用,遷移快,不帶電的遷移速度次之,帶負電的遷移速度慢,從而實現(xiàn)各蛋白組分的分離。

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